Quy trình định danh vi khuẩn

trường hợp áp dụng cách thức nuôi cấy phân lập với định danh vi trùng để chẩn đoán dịch gan thận mủ ở những basa thì cần dựa vào những tiêu chuẩn nào? Làm ráng nào để hoàn toàn có thể định danh được vi khuẩn tạo ra bệnh sinh sống cá? thắc mắc của anh Nguyện từ cần Thơ.
*
Nội dung chủ yếu

Thiết bị cơ chế dùng trong phương pháp nuôi cấy phân lập định danh vi khuẩn để chẩn đoán căn bệnh gan thận mủ sinh sống cá basa bao gồm những thiết bị cơ chế nào?

*

Bệnh gan thận mủ nghỉ ngơi cá basa (Hình tự Internet)

Theo Mục 4 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8710-16:2016 về bệnh dịch thủy sản - quy trình chẩn đoán - Phần 16: bệnh gan thận mủ ở cá da trơn chế độ về thiết bị khí cụ dùng trong cách thức nuôi ghép phân lập cùng định danh vi trùng như sau:

Thiết bị, dụng cụSử dụng thiết bị, mức sử dụng thông thường của phòng thử nghiệm sinh học và hồ hết thiết bị, nguyên tắc sau:4.1 Thiết bị, dụng cụ sử dụng cho cách thức nuôi cấy, phân lập, định danh vi khuẩn4.1.1 Nồi hấp vô trùng, bảo trì nhiệt độ 115°C với 121°C.

Bạn đang xem: Quy trình định danh vi khuẩn

4.1.2 Tủ ấm, gồm thể duy trì nhiệt độ nghỉ ngơi 28°C mang lại 37°C.4.1.3 Kính hiển vi quang quẻ học, đồ kính 10 X, 20 X, 40 X và 100 X.4.1.4 Ống nghiệm vô trùng, địa điểm 15 ml.4.1.5 Đèn cồn.4.1.6 Que cấy.4.1.7 Phiến kính, vô trùng.4.1.8 Lamen, vô trùng.4.1.9 Dao mổ, panh, kéo vô trùng.4.2 Thiết bị, dụng cụ thực hiện cho phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) cùng Real-time PCR4.2.1 vật dụng nhân ren (PCR)4.2.2 sản phẩm Real-time PCR4.2.3 sản phẩm ly tâm, hoàn toàn có thể ly trung khu với vận tốc 6 000 g và 20 000 g.4.2.4 đồ vật lắc trộn vortex.4.2.5 sản phẩm công nghệ spindown.4.2.6 Bể ủ nhiệt, gia hạn nhiệt độ tự 55°C mang đến 60°C.4.2.7 bộ điện di, bao gồm bộ nguồn và bể chạy năng lượng điện di.4.2.8 thứ đọc gel.

Theo đó, thiết bị cách thức dùng trong phương thức nuôi ghép phân lập cùng định danh vi trùng gồm:

- Thiết bị, dụng cụ thực hiện cho cách thức nuôi cấy, phân lập, định danh vi khuẩn

- Nồi hấp vô trùng, gia hạn nhiệt độ 115°C với 121°C.

- Tủ ấm, gồm thể bảo trì nhiệt độ sinh hoạt 28°C mang đến 37°C.

- Kính hiển vi quang đãng học, đồ vật kính 10 X, đôi mươi X, 40 X cùng 100 X.

- Ống nghiệm vô trùng, thể tích 15 ml.

- Đèn cồn.

- Que cấy.

- Phiến kính, vô trùng.

- Lamen, vô trùng.

Xem thêm: Những Bộ Phim Về Trẻ Em Hay Nhất 2022 Dành Cho Trẻ Em Nhân Ngày 1/6

- Dao mổ, panh, kéo vô trùng.

Xác định đăng tính sinh hóa trong phương pháp nuôi cấy phân lập cùng định danh vi trùng dựa theo phần lớn chỉ tiêu nào?

Theo máu 6.1.3.2.2 đái mục 6.1 Mục 6 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8710-16:2016 về dịch thủy sản - tiến trình chẩn đoán - Phần 16: dịch gan thận mủ ngơi nghỉ cá da trơn phương tiện về xác định đặc tính sinh hóa của vi khuẩn gây ra bệnh gan thận mủ sống cá basa như sau:

Chẩn đoán trong phòng thí nghiệm6.1 giám định Edwardsiella ictaluri bằng phương pháp nuôi cấy, phân lập, định danh vi khuẩn...6.1.3 bí quyết tiến hành...6.1.3.2.2 khẳng định các đặc tính sinh hóaXác định các đặc tính sinh hóa của vi khuẩn dựa vào một số tiêu chí cơ bản: vi khuẩn di động, gram âm, âm tính với oxidase, dương tính với catalase, O/F dương tính và các chỉ tiêu sinh hóa nêu vào bảng 1.
*
- xác định các chỉ tiêu di động, oxidase, catalase với phản ứng O/F của vi trùng (xem Phụ lục B).- thực hiện các phản nghịch ứng sinh hóa.VÍ DỤ: sử dụng bộ kít API 20E (xem Phụ lục C), hiệu quả được phát âm bằng phần mềm đọc hiệu quả API 20E

Theo đó, khi áp dụng phương pháp nuôi cấy phân lập và định danh vi trùng thì việc xác định các công năng sinh hóa của vi khuẩn gây nên bệnh gan thận mủ ở cá basa được dựa theo những chỉ tiêu sinh hóa theo bảng 1 Tiêu chuẩn nêu trên.

Thực hiện tại định danh vi khuẩn trong cách thức nuôi cấy phân lập và định danh vi khuẩn để chẩn đoán bệnh gan thận mủ ngơi nghỉ cá basa như thế nào?

Theo Phục lục C Tiêu chuẩn chỉnh quốc gia TCVN 8710-16:2016 về căn bệnh thủy sản - quá trình chẩn đoán - Phần 16: bệnh dịch gan thận mủ làm việc cá da trơn quy định về cách định danh vi khuẩn gây bệnh dịch gan thận mủ sinh sống cá basa như sau:

Định danh vi khuẩn bằng bộ kít API trăng tròn EC.1 Thuốc demo và vật tư thửC.1.1 bộ kít API trăng tròn E.C.1.2 Nước muối bột sinh lý.C.1.3 Nước đựng tiệt trùng.C.1.4 Parafin, vẫn tiệt trùng.C.3 phương pháp tiến hànhDùng que tiệt trùng mang một ít khuẩn lạc cho vô 5 ml nước muối hạt sinh lý (C.1.2), rung lắc trộn đều.Cho một không nhiều nước cất tiệt trùng (C.1.3) vào khay nhựa của bộ kít để giữ ẩm khi ủ vào tủ ấm (4.1.2).Dùng pipet cùng với đầu týp vô trùng hút dung dịch vi khuẩn cho vào từng ô của bộ kít. Nhỏ dung dịch vi khuẩn vừa đủ vào toàn bộ các ô CIT, VP, GEL thì nhỏ tuổi đầy, 5 ô ADH, LDC, ODC, H2S cùng URE bỏ thêm parafin diệt trùng (C.1.4) nhằm tạo đk yếm khí.Đậy nắp khay lại với ủ vào tủ ấm (4.1.2) sinh hoạt 28°C.Đọc kết quả sau 18 h mang đến 24 h.C.3 Đọc kết quảa) khám nghiệm và ghi nhận toàn bộ các chỉ tiêu không yêu cầu cho thêm thuốc thử, đọc tác dụng dựa vào bảng C.1.b) Đối với các chỉ tiêu cần áp dụng thuốc thử:+ TDA: bé dại một giọt thuốc demo TDA. Màu sắc đen xuất hiện thì công dụng là bội nghịch ứng dương tính, màu kim cương thì hiệu quả phản ứng âm tính;+ IND: bé dại một giọt thuốc demo IND. Đợi 2 min. Một vòng màu đỏ mở ra là bội nghịch ứng dương tính, màu vàng là âm tính;+ VP: thêm một giọt theo lần lượt mỗi dung dịch thuốc demo VP1, VP2. Đợi ít nhất 10 min, color hồng hoặc đỏ lộ diện là phản bội ứng dương tính. Ví như màu hồng nhạt xuất hiện trong vòng 10 min cho 12 min là phản nghịch ứng âm tính.
*

Theo đó để định danh được vi trùng Edwardsiella ictaluri cần chuẩn bị Bộ kít API đôi mươi E; nước muối bột sinh lý; nước đựng tiệt trùng; Parafin, đang tiệt trùng.

Dùng que tiệt trùng lấy một ít khuẩn lạc cho vô 5 ml nước muối hạt sinh lý, rung lắc trộn đều.Cho một không nhiều nước cất tiệt trùng vào khay nhựa của bộ kít để giữ ẩm khi ủ ở trong tủ ấm.

Dùng pipet cùng với đầu týp tiệt trùng hút dung dịch vi trùng cho vào từng ô của cục kít. Bé dại dung dịch vi trùng vừa đầy đủ vào toàn bộ các ô CIT, VP, GEL thì nhỏ dại đầy, 5 ô ADH, LDC, ODC, H2S với URE nếm nếm thêm parafin tiệt trùng để tạo đk yếm khí.

Cuối cùng là đậy nắp khay lại và ủ trong tủ ấm ở 28°C và đọc công dụng sau 18 h cho 24 h. Kết vượt định danh vi khuẩn gây nên bệnh gan thận mủ ở cá sẽ dựa theo bảng C1 tiêu chuẩn nêu trên.

Đối với những chỉ tiêu cần sử dụng thuốc demo ta thực hiện như sau:

- TDA: nhỏ tuổi một giọt thuốc demo TDA. Màu sắc đen lộ diện thì công dụng là bội nghịch ứng dương tính, màu rubi thì kết quả phản ứng âm tính;

- IND: nhỏ một giọt thuốc thử IND. Đợi 2 min. Một vòng màu sắc đỏ xuất hiện thêm là bội nghịch ứng dương tính, màu tiến thưởng là âm tính;

- VP: thêm một giọt theo thứ tự mỗi hỗn hợp thuốc test VP1, VP2. Đợi tối thiểu 10 min, color hồng hoặc đỏ mở ra là phản nghịch ứng dương tính. Trường hợp màu hồng nhạt xuất hiện thêm trong vòng 10 min mang lại 12 min là phản bội ứng âm tính.